Гель-электрофорез — один из основных методов, используемых в молекулярной биологии для анализа ДНК.Этот метод включает миграцию фрагментов ДНК через гель, где они разделяются по размеру или форме.Однако сталкивались ли вы когда-нибудь с какими-либо ошибками во время экспериментов по электрофорезу, такими как размазывание полос на агарозном геле или отсутствие полос на геле?В чем может быть причина этих ошибок?
Наши технические специалисты обобщили здесь несколько способов устранения неполадок.
1. Размазанные полосы на агарозном геле.
●ДНК деградировала.Избегайте загрязнения нуклеазой.
● Буфер для электрофореза несвежий.После многократного использования буфера для электрофореза ионная сила снижается, а значение его pH увеличивается, поэтому буферная емкость ослабевает, что влияет на эффект электрофореза.Рекомендуется часто заменять буфер для электрофореза.
● Использовались неправильные условия электрофореза.Не допускайте превышения напряжения 20 В/см и поддерживайте температуру <30°C во время электрофореза.Для электрофореза гигантской цепи ДНК температура должна быть <15° C. Убедитесь, что буфер для электрофореза имеет достаточную буферную емкость.
● В гель было загружено слишком много ДНК.Уменьшить количество ДНК.
● Слишком много соли в ДНК.Используйте осаждение этанолом, чтобы заранее удалить излишки солей.
● ДНК была загрязнена белком.Используйте фенольную экстракцию для более глубокого удаления белка.
● ДНК была денатурирована.Не нагревайте перед электрофорезом.Разбавьте ДНК в буфере с 20 мМ NaCl.
2. Аномалии миграции полос ДНК
● Ренатурация сайта COS фрагмента λHind III.Перед электрофорезом нагрейте ДНК в течение 5 минут при температуре 65°C, а затем охладите ее на льду в течение 5 минут.
● Использовались неправильные условия электрофореза.Не допускайте превышения напряжения 20 В/см и поддерживайте температуру <30°C во время электрофореза.Убедитесь, что буфер для электрофореза имеет достаточную буферную емкость.
● ДНК была денатурирована.Не нагревайте перед электрофорезом.Разбавьте ДНК в буфере с 20 мМ NaCl.
3. Слабые полосы ДНК на агарозном геле или их отсутствие.
● В гель было загружено недостаточное количество или концентрация ДНК.Увеличение количества ДНК.Электрофорез в полиакриламидном геле немного более чувствителен, чем электрофорез в агарозе, и загрузку образца можно соответствующим образом уменьшить.
● ДНК была деградирована.Избегайте загрязнения нуклеазой.
● ДНК подвергали электрофорезу с геля.Электрофорезируйте гель в течение меньшего времени, используйте более низкое напряжение или используйте гель с более высоким процентом содержания.
● Для визуализации ДНК, окрашенной бромидом этидия, использовался неправильный источник света W.Для большей чувствительности используйте коротковолновый (254 нм) свет W.
4. Полосы ДНК отсутствуют.
●ДНК небольшого размера подвергали электрофорезу из геля.Электрофорезируйте гель в течение меньшего времени, используйте более низкое напряжение или используйте гель с более высоким процентом содержания.
● Трудно различить полосы ДНК одинаковой молекулы.Увеличьте время электрофореза и проверьте концентрациюгеля, чтобы убедиться, что процент геля будет использован правильно.
● ДНК была денатурирована.Не нагревайте перед электрофорезом.Разбавьте ДНК в буфере с 20 мМ NaCl.
● Нити ДНК огромны, и обычный гель-электрофорез не подходит.Анализ на импульсном гель-электрофорезе.Какие еще проблемы у вас возникали при электрофорезе в агарозном геле?В будущем мы будем искать больше гидов.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) — специализированная компания, специализирующаяся на продуктах, связанных с электрофорезом, в Китае.Его история начинается в 1970 году, когда Китай еще не вступил в период реформ и открытости.Благодаря многолетнему развитию Liuyi Bitotech имеет собственный бренд, известный на внутреннем рынке продуктов для электрофореза как бренд Liuyi.
Бренд Liuyi имеет более чем 50-летнюю историю в Китае, и компания может поставлять стабильную и высококачественную продукцию по всему миру.Благодаря многолетнему развитию он достоин вашего выбора!
Ячейки для горизонтального электрофореза (резервуары/камеры) Liuyi Biotech отличаются высоким качеством и хорошим внешним видом.Благодаря различным размерам лотков с гелем они могут удовлетворить ваши различные экспериментальные требования.У нас есть собственная техническая команда и фабрика.От проектирования до производства, от сырья до ключевых деталей — мы можем контролировать весь процесс.Серия DYCP 31 предназначена для электрофореза ДНК, которые являются модельными.ДИКП-31БН, ДYCP-31CN,ДИКП-31ДН, иДИКП-31Э.Различия между ними заключаются в размерах геля и цене.Мы предоставляем нашим клиентам полноразмерную продукцию.МодельДИКП-32СМогу сделать самый большой гель 250мм*250мм.
Между тем, мы рекомендуем наш источник питания для электрофореза.ДYY-6C,ДYY-6DиДYY-10Cдля наших электрофорезных ячеек (резервуаров/камер) серий DYCP-31 и 32.
Если вам нужна дополнительная информация о продуктах, посетите этот веб-сайт, чтобы получить больше, и свяжитесь с нами по электронной почте, чтобы сообщить нам, что вы хотите, и посмотреть, сможем ли мы предоставить вам решения.
Для получения дополнительной информации о нас, пожалуйста, свяжитесь с нами по электронной почте[электронная почта защищена], [электронная почта защищена].
Время публикации: 09 мая 2022 г.