Подготовка агарозного геля для электрофореза
Примечание: Всегда надевайте одноразовые перчатки!
Пошаговые инструкции
Взвешивание порошка агарозы:uИспользуйте бумагу для взвешивания и электронные весы для измерения 0,3 г порошка агарозы (в расчете на систему объемом 30 мл).
Подготовка буфера TBST:pвосстановить 30 мл 1x буфера TBST в колбе Эрленмейера емкостью 100 мл.
Растворение порошка агарозы:pПоместите порошок агарозы в буфер TBST и хорошо встряхните.Поместите их вв микроволновую печь и нагревайте (обычно в течение 50 секунд, накрыв алюминиевой фольгой) до полного растворения.
Охлаждение и добавление нуклеазы:uНаденьте перчатки, чтобы достать смесь из микроволновой печи, и дайте ей немного остыть в холодной воде, пока она не станет теплой (приблизительно 60°C). Добавьте 2 мкл нуклеазы (заменитель Eb), тщательно встряхивая.
Подготовка формы для геля:
- Cпостный и сухойлоток для геля и устройство для заливки гелярезервуара для электрофореза.
- Pзавязать гельподносво внутренний резервуар и вставьте гребенку в фиксированное положение.
- Смешайте раствор агарозного геля, охлажденный примерно до 65°С, и осторожно вылейте его нагелевый лотоквустройство для заливки геля, медленно распределяя его до тех пор, пока он не образует ровный слой геля на стеклянной пластине.
- Оставьте при комнатной температуре до полного затвердевания геля.
- Аккуратно снимите расческу вертикально и снимите ленту.
- Поместите гельподносв резервуар для электрофореза.
Важно: Убедитесь, что в области зубьев расчески нет пузырьков воздуха. Поверхность жидкости должна быть гладкой без ряби.
Запуск геля
Загрузка геля
После затвердевания геля поместите его в резервуар для электрофореза и налейте буфер для электрофореза до тех пор, пока гель не погрузится в воду.
Подготовка образцов
- Возьмите маркер и загрузочный буфер из холодильника.
- Добавьте к образцам 6 мкл загрузочного буфера и хорошо перемешайте.
- Используя микропипетку, медленно загружайте образцы в большие лунки геля (будьте осторожны, чтобы не проколоть гель и не дозируйте весь объем, чтобы избежать образования пузырьков воздуха).
- Загрузите маркер в любую из маленьких лунок (запомните его положение).
Начало электрофореза
- Накройте резервуар для электрофореза и начните электрофорез сразу после загрузки геля.
- Установите напряжение 60-100В. Образцы будут мигрировать от отрицательного электрода (черного) к положительному электроду (красному).
- Более высокое напряжение сокращает эффективный диапазон разделения агарозного геля.
- Прекратите электрофорез, когда краситель бромфеноловый синий достигнет примерно 1 см от нижнего края гелевой пластины.
Наблюдение за результатами
После разделения полос прекратите электрофорез, выньте гель и сразу же обнаружите и сфотографируйте его.
Используйте систему визуализации геля для фотографирования и наблюдения за полосами (проверьте, есть ли полосы для маркера или образцов).
Получив карту гелевых полос, найдите маркер. По маркеру можно определить целевые диапазоны!
Компания Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) уже более 50 лет производит продукты для электрофореза. Здесь мы представляем наши системы горизонтального электрофореза дляагарозный гельэлектрофорез.Выбиратьсистемы горизонтального электрофорезаЛюи из Пекина за эксперимент по гель-электрофорезу, который поможет вашим исследованиям в области биотехнологий.
Мы предлагаем различные модели горизонтальных резервуаров для электрофореза для разливки и обработки небольших объемов.агарозагели до больших размеровагарозагели
Руководство по выбору установки для горизонтального погружного гель-электрофореза
Компания Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) уже более 50 лет специализируется на производстве инструментов для электрофореза и располагает собственной профессиональной технической командой и центром исследований и разработок. У нас есть надежная и полная производственная линия от проектирования до проверки, склад и маркетинговая поддержка. Нашей основной продукцией являются ячейки для электрофореза (резервуары/камеры), источники питания для электрофореза, трансиллюминаторы с синими светодиодами, УФ-трансиллюминаторы, системы изображений и анализа гелей и т. д. Мы также поставляем лабораторные инструменты, такие как инструменты для ПЦР, вихревые смесители и центрифуги для лабораторий.
Если у вас есть план закупок нашей продукции, пожалуйста, не стесняйтесь обращаться к нам. Вы можете отправить нам сообщение по электронной почте[электронная почта защищена]или[электронная почта защищена]или позвоните нам по телефону +86 15810650221 или добавьте WhatsApp +86 15810650221 или Wechat: 15810650221.
Пожалуйста, отсканируйте QR-код, чтобы добавить его в WhatsApp или WeChat.
Время публикации: 09 августа 2024 г.